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Product Center當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心專用儀器儀表DP-1紫外檢測儀(性能雙光束雙波長)/雙波長紫外檢測儀
紫外檢測儀(性能雙光束雙波長)/雙波長紫外檢測儀
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產(chǎn)品分類紫外檢測儀(性能雙光束雙波長)/雙波長紫外檢測儀
型號:DP-1
波長范圍: 254nm、280nm(同時(shí)檢測)、 可在254nm、280nm-400nm譜線之間選兩個波長同時(shí)檢測。 內(nèi)置數(shù)據(jù)處理 ,雙顯示屏。 蛋白質(zhì)280nm/254nm雙波長測定: 蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。它們具有吸收紫外光的性質(zhì),其吸收峰在280nm波長處,且在此波長內(nèi)吸收峰的光密度值與其濃度成正比關(guān)系,故可作為蛋白質(zhì)定性、定量測定的依據(jù),正因?yàn)槿绱耍?80nm處的紫外吸收法通常被用于層析系統(tǒng)中蛋白質(zhì)濃度的連續(xù)監(jiān)控。但由于各種蛋白質(zhì)的酪氨酸和色氨酸的含量不同,故要準(zhǔn)確定量,需要有待測蛋白質(zhì)的純品作為標(biāo)準(zhǔn)來,或且已經(jīng)知道其消光系數(shù)作為參考。另外,不少非蛋白物質(zhì)在280nm波長下也有—定吸收能力,可能發(fā)生干擾。其中尤以核酸(嘌呤和嘧啶堿)的影響更為嚴(yán)重。在280nm處的吸收比蛋白質(zhì)強(qiáng)10倍(每克),但核酸在254nm處的吸收更強(qiáng),其吸收峰在254nm附近。核酸254nm處的消光系數(shù)是280nm處的2倍,而蛋白質(zhì)則相反,280nm紫外吸收值大于254nm的吸收值。通常: 純蛋白質(zhì)的光吸收比值:A280/A254 && 1.8 純核酸的光吸收比值: A280/A254 << 0.5 因此蛋白質(zhì)溶液中同時(shí)存在核酸時(shí)(生物體系大多數(shù)如此),同時(shí)測定OD254nm,與OD280nm。然后根據(jù)兩種波長的吸收度的比值,通過經(jīng)驗(yàn)公式校正,以消除核酸的影響而推算出蛋白質(zhì)的真實(shí)含量。 蛋白質(zhì)濃度=1.45×A280-0.74×A254 (mg/ml) 此經(jīng)驗(yàn)公式是通過系列已知不同濃度比例的蛋白質(zhì)(酵母烯醇化酶)和核酸(酵母核酸)的混合液所測定的數(shù)據(jù)來建立的。 |
應(yīng)用范圍: 性能雙光束紫外檢測儀,用于 蛋白質(zhì)、酶、核酸、核苷酸、多肽、(含/不含芳香族氨基酸)及其它何有紫外吸收的生物/非生物樣品的分離分析、流動檢測。 1.光 源: 紫外光譜燈,光源使用壽命達(dá)1小時(shí) (等同于外AKT的光源),儀器可不關(guān)機(jī)連續(xù)作; |